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上海莼試生物技術有限公司
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ATCC細胞傳代后多久能轉染?

時間:2017/8/22閱讀:424
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常見的實驗室ATCC細胞傳代方法有貼壁細胞用消化法傳代和懸浮生長的細胞采用離心分離后傳代。貼壁細胞消化時,因細胞對*的敏感程度不同,所以消化時間差別較大。對于初學者,消化的程度也很難掌握好,加入適量*,輕輕搖晃3-4次(使細胞充分與*接觸),隨即吸取*,放于培養箱消化,數分鐘后取出,輕拍培養瓶,見細胞自瓶壁滑下即可,若沒,繼續消化。

細胞轉染是指取對數生長的細胞,接種于培養板,加培養液,培養過夜(細胞長至85-90%滿);按說明書進行轉染實驗。轉染時應注意預備脂質體/DNA混合物必須在無血清下進行。在轉染之前更換培養基,可提高轉染效率,但所用培養基必須37℃預溫。 脂質體/ DNA混合物應當逐滴加入,盡可能保持一致,從培養皿一邊到另一邊,邊加入邊輕搖培養皿,以確保均勻分布和避免局部高濃度。

對于細胞轉染,一般在細胞中期轉染,轉染效率會相對高一些。這個時候的細胞狀態是的。對于HEK293T來說,一般轉染的時間是在傳代后24hr以內。轉染后48hr,外源基因肯定是有表達的。至于72hr,應該也還是有表達的,ATCC細胞可能表達量會很低,主要是這個時間點的細胞大部分都衰老了。建議293T收集細胞,在轉染后36-48hr收集。
YSRIBIO012    Zidovudine     *標準品    30516-87-1     400mg    
YSRIBIO013    Zalcitabine Related Compound A    扎西他濱相關物質A標準品    7481-88-1     50mg    
YSRIBIO014    Zalcitabine    扎西他濱標準品    7481-89-2     200mg    
YSRIBIO015    Yohimbine Hydrochloride    鹽酸育亨賓標準品    65-19-0     200mg    
ATCC細胞

 

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